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細(xì)胞詳述

根據(jù)不同來(lái)源及分化階段，干細(xì)胞可分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞具有分化為多種不同組織的能力，但在倫理上存在爭(zhēng)議。成體干細(xì)胞因其來(lái)源廣泛、增殖能力強(qiáng)等特點(diǎn)，現(xiàn)已成為組織工程學(xué)研究的首選種子細(xì)胞。其中，脂肪干細(xì)胞作為組織工程修復(fù)的種子細(xì)胞，因其具有來(lái)源豐富、取材容易、增殖能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，正受到越來(lái)越多的關(guān)注。

脂肪干細(xì)胞形態(tài)類(lèi)似成纖維細(xì)胞，具有較強(qiáng)的增殖能力。在一定的誘導(dǎo)條件下，可分化為脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞、上皮細(xì)胞等，具有多向分化潛能。

通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶RFP基因。（轉(zhuǎn)染后此細(xì)胞帶有嘌呤霉素抗性）。穩(wěn)定表達(dá)RFP蛋白。

注意事項(xiàng)：  收到細(xì)胞后第一次傳代建議1：2傳代，充液培養(yǎng)基可以用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。

細(xì)胞篩選

該細(xì)胞為已經(jīng)構(gòu)建好穩(wěn)定轉(zhuǎn)染RFP的細(xì)胞，隨細(xì)胞傳代次數(shù)的增加，其RFP熒光強(qiáng)度會(huì)逐漸減弱。若實(shí)驗(yàn)要求需要維持熒光強(qiáng)度，可以加入嘌呤霉素進(jìn)行再次篩選。建議收到細(xì)胞后至少傳3代，凍存留種后再進(jìn)行篩選。

初次進(jìn)行細(xì)胞篩選時(shí)，建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基維持培養(yǎng)，若無(wú)細(xì)胞漂浮或者漂浮較少，即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基繼續(xù)篩選，以此類(lèi)推，至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過(guò)程中，漂浮細(xì)胞大于60%，則停止篩選，換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng)，至細(xì)胞密度約80%，可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進(jìn)行篩選。當(dāng)加入5ug/ml嘌呤霉素時(shí)細(xì)胞正常增殖，可停止篩選，用不含藥完全培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。

細(xì)胞特性

1) 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常脂肪組織。

2) 細(xì)胞鑒定：CD44免疫熒光染色為陽(yáng)性，CD45免疫熒光染色為陰性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基

我們推薦使用 SD大鼠脂肪干細(xì)胞+RFP細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基（iCell-0049a-001b ）作為體外培養(yǎng)原代脂肪干細(xì)胞的培養(yǎng)基。

運(yùn)輸和保存

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

產(chǎn)品使用

1) 本產(chǎn)品僅能用于科研

2) 本產(chǎn)品未通過(guò)直接用于活體動(dòng)物和人的審核

3) 本產(chǎn)品未通過(guò)用于活體診斷的審核