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細(xì)胞詳述

臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。臍帶中通過尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管，與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒來的廢物運(yùn)送至胎盤，臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒。

由于臍帶是分娩過程中的廢棄物，同時(shí)從臍帶中分離人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞方法相對(duì)成熟，使得人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞作為工具細(xì)胞，在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)研究領(lǐng)域中獲得廣泛應(yīng)用。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶GFP基因。（轉(zhuǎn)染后此細(xì)胞帶有嘌呤霉素抗性）。穩(wěn)定表達(dá)GFP蛋白。

注意事項(xiàng)：  收到細(xì)胞后第一次傳代建議1：2傳代，充液培養(yǎng)基可以用來培養(yǎng)細(xì)胞。

細(xì)胞篩選

該細(xì)胞為已經(jīng)構(gòu)建好穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GFP的細(xì)胞，隨細(xì)胞傳代次數(shù)的增加，其GFP熒光強(qiáng)度會(huì)逐漸減弱。若實(shí)驗(yàn)要求需要維持熒光強(qiáng)度，可以加入嘌呤霉素進(jìn)行再次篩選。建議收到細(xì)胞后至少傳3代，凍存留種后再進(jìn)行篩選。

初次進(jìn)行細(xì)胞篩選時(shí)，建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基維持培養(yǎng)，若無細(xì)胞漂浮或者漂浮較少，即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基繼續(xù)篩選，以此類推，至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中，漂浮細(xì)胞大于60%，則停止篩選，換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng)，至細(xì)胞密度約80%，可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進(jìn)行篩選。當(dāng)加入5ug/ml嘌呤霉素時(shí)細(xì)胞正常增殖，可停止篩選，用不含藥完全培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。

細(xì)胞特性

1) 細(xì)胞來源于人臍帶組織。

2) 細(xì)胞鑒定：血小板-內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子（PECAM-1/CD31）或血管假性血友病因子（vWF）免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基

我們推薦使用人臍靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基（iCell-0050a-001b）作為體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞+GFP細(xì)胞的培養(yǎng)基。

運(yùn)輸和保存

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

產(chǎn)品使用

1) 本產(chǎn)品僅能用于科研

2) 本產(chǎn)品未通過直接用于活體動(dòng)物和人的審核

3) 本產(chǎn)品未通過用于活體診斷的審核