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貨號(hào)：H9Med-iCell-CA003        

儲(chǔ)存條件：2 ~ 8 ℃

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

H9細(xì)胞消化液可以應(yīng)用于非飼養(yǎng)層依賴(lài)的H9傳代，該工作液屬于非酶類(lèi)溫和消化液，對(duì)細(xì)胞損傷小且消化時(shí)間適中便于操作，是一種已被普遍使用的消化液，可與H9培養(yǎng)基搭配使用。

操作說(shuō)明

1、消化前，準(zhǔn)備 37 ℃預(yù)熱好的無(wú)鈣鎂PBS 溶液及消化液，完全培養(yǎng)基。

2、吸走上清，并加入37℃預(yù)熱好的PBS 溶液清洗1次。

3、加入適量（按 6 孔板每孔加 1mL，6cm 皿加 2mL，10cm 皿加 3mL 的量）的 37℃預(yù)熱好的消化液。

4、37℃放置1-2min，用手指輕彈皿/板/瓶身，顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣開(kāi)始脫離培養(yǎng)皿/板底，克隆內(nèi)部大部分細(xì)胞成團(tuán)脫落。

5、加入適量的完全培養(yǎng)基終止消化。

6、移入離心管，300g離心5min。

7、吸出培養(yǎng)基，確保細(xì)胞團(tuán)完整。

8、然后緩慢加入1mL完全培養(yǎng)基，用手指輕彈離心管底部，使細(xì)胞團(tuán)脫離底部并分散。

9、傳代比例為 1：6—1：8，根據(jù)最終培養(yǎng)細(xì)胞的液體體積，加入ROCK inhibitor Y27632，終濃度為10μM。

10、將培養(yǎng)皿/板/瓶置于37℃培養(yǎng)箱中，每天更換培養(yǎng)基（換液不需要再添加Y27632，但培養(yǎng)基需提前預(yù)熱）。

 注：

1.吹吸的力度要輕柔，吹打脫落和吹吸混勻的次數(shù)總共不超過(guò)10次為宜。吹打過(guò)度導(dǎo)致大量單細(xì)胞出現(xiàn)是造成細(xì)胞分化或死亡的重要原因。

2.若有少量細(xì)胞無(wú)法從皿底脫落，屬于正?，F(xiàn)象，需延長(zhǎng)消化時(shí)間。