青青草原成人在线免费视频-欧美精品青青久久久久久-看全黄大片视频不卡-亚洲欧洲成人av蜜臀-久久伊人激情综合网-国产一区激情在线观看-蜜臀国产一区二区三区在线-超碰超碰超碰超av大香-亚洲国产精品久久久久婷婷软件

       篩選步驟：

       a.殺滅曲線的確定
       1.將未轉染的細胞按每孔0.05million鋪入24孔板，孵育過夜，
       2.第二天，除去24孔板中舊的培養(yǎng)基，
       3.將含不同濃度嘌呤霉素（1ug/mL，2ug/mL，3ug/mL，4ug/mL，5 ug/mL，6ug/mL，7ug/mL）的新鮮培養(yǎng)基加入已鋪有細胞的24孔板，
       4.每2天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基，
       5.每天觀察細胞的存活比例，

       6.最小的嘌呤霉素使用濃度就是從嘌呤霉素篩選開始1-4d內殺死所有細胞的最低篩選濃度。

      b.嘌呤霉素篩選轉染細胞
      1.第一天，將轉染的細胞按每孔0.05million鋪入24孔板，孵育過夜
      2.第二天，除去24孔板中舊的培養(yǎng)基，
      3.加入含嘌呤霉素（2ug/mL）的篩選培養(yǎng)基，孵育，
      4.每2天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基，
      5.每天觀察細胞的存活比例，
      6.在同一時間點（2d）存活的細胞，即為轉染成功細胞，
      7.對篩選后的細胞進行擴增。