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細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)染方法和步驟【賽百慷】
作者:賽百慷    日期:2017-08-11


        一、貼壁細(xì)胞的轉(zhuǎn)染
       1.提前一天將細(xì)胞接種6孔板,每孔細(xì)胞數(shù)約為1×105 個(gè),
       2.第二天,待細(xì)胞貼壁后,換液,
       3.加入1mL完全培養(yǎng)基,再加20 μL 慢病毒,
       4.混勻后繼續(xù)培養(yǎng),
       5.12h后觀察細(xì)胞狀態(tài),并更換為新鮮培養(yǎng)基,
       6.轉(zhuǎn)染1周后,觀察細(xì)胞生長情況,中途可以換液,保持細(xì)胞的活性,

       7.當(dāng)細(xì)胞長滿板底后,傳代至T25培養(yǎng)瓶中。


 


       二、懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染
       1.提前一天將細(xì)胞接種6孔板,每孔細(xì)胞數(shù)約為3×105 個(gè),
       2.第二天,換液后加入1mL完全培養(yǎng)基,再加20 μL 慢病毒,
       3.混勻后繼續(xù)培養(yǎng),
       4.12h后觀察細(xì)胞狀態(tài),并更換為新鮮培養(yǎng)基,
       5.轉(zhuǎn)染1周后,觀察細(xì)胞生長情況,中途可以換液,保持細(xì)胞的活性。
 


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